Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Smad8 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402119-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Smad8O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Smad8 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Smad8 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SMAD9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Smad8 Anticorpo (3E5): sc-293413
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Smad8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402119-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Smad8 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402119-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMAD9 codifica a Smad8, um SMAD regulado por receptor que transduz sinais de proteínas morfogenéticas ósseas (BMP) de receptores do tipo I ativados para o núcleo. Após fosforilação na região C-terminal, a Smad8 forma complexos com a SMAD4 e coordena programas transcricionais que controlam a diferenciação osteogênica e condrogênica, a remodelação da matriz extracelular e a padronização do desenvolvimento. A sinalização BMP/SMAD dependente de SMAD9 se intersecta com MAPK e outras vias específicas do contexto para ajustar a amplitude e a duração do sinal. A desregulação desse eixo tem sido associada a alterações na homeostase esquelética e a fenótipos de remodelação vascular, sustentando estudos mecanísticos de SMAD9 em modelos de comprometimento de linhagem e remodelação tecidual.
Smad8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SMAD9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SMAD9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SMAD9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SMAD9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.