Ska2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405933

概要

SKA2は、紡錘体・動原体関連複合体サブユニット2（Ska2）をコードしており、Ska2はSKA複合体の中核構成要素です。SKA複合体はNDC80複合体と協調して、有糸分裂中の動原体‐微小管結合を安定化します。Ska2は、微小管の端部（エンドオン）での持続的な結合を促進し、さらにスピンドルチェックポイントのサイレンシングにも寄与することで、染色体の整列（コンゲレッション）および後期（アナフェーズ）開始を支えます。このような有糸分裂進行における役割を通じて、SKA2は細胞周期ダイナミクス、染色体分配の忠実性、そしてゲノム安定性に影響を与えます。SKA2の発現や機能の破綻は、複数の疾患状況で観察される増殖性表現型や染色体不安定性と関連づけられており、分裂に伴うストレス応答の機構研究において重要な標的となります。

Ska2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSKA2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SKA2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SKA2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Ska2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Ska2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SKA2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Ska2の機能に不可欠なSKA2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SKA2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Ska2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSka2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SKA2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Ska2 HDRプラスミド（h）および Ska2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSKA2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSKA2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。