SIP1/ZEB2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400655-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SIP1/ZEB2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SIP1/ZEB2 Double Nickase Plasmid (h) e il SIP1/ZEB2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ZEB2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SIP1/ZEB2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400655-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SIP1/ZEB2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400655-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZEB2 (noto anche come SIP1) codifica un fattore di trascrizione a dita di zinco che si lega alle E-box e agisce prevalentemente come repressore trascrizionale, controllando la transizione epitelio-mesenchimale, la specificazione di linea e le decisioni di destino cellulare. Legandosi ai motivi E-box e reclutando complessi corepressori associati a CtBP/SMAD, SIP1/ZEB2 integra la segnalazione TGF-β/BMP con programmi di rimodellamento della cromatina per modulare geni della polarità epiteliale, l’adesione cellulare e i fenotipi migratori. Le reti trascrizionali dipendenti da ZEB2 contribuiscono allo sviluppo della cresta neurale e alla differenziazione delle cellule immunitarie, e la deregolazione dell’espressione o dell’attività di ZEB2 è collegata a sindromi dello sviluppo e a stati di differenziazione alterati in contesti rilevanti per il cancro. Queste proprietà rendono ZEB2 un nodo ampiamente utilizzato per studi meccanicistici sul controllo della trascrizione, sulla plasticità e sull’accoppiamento tra segnalazione ed espressione genica.
SIP1/ZEB2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ZEB2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ZEB2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ZEB2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ZEB2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.