SIM1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-405931-LAC

SIM1（single-minded family bHLH transcription factor 1）は神経系の転写制御因子で、ARNT2とヘテロ二量体を形成し、E-box様モチーフに結合して、視床下部の発生、神経内分泌系の分化決定、エネルギー恒常性を司る遺伝子プログラムを制御します。bHLH-PASシグナル伝達ネットワークの一部として、SIM1は満腹シグナル経路、メラノコルチンシグナルの出力、さらに中枢神経系における分化や軸索ガイダンスなどの広範な過程に関わる転写回路に影響を与えます。SIM1の用量変化や制御異常は、視床下部機能障害や重度の肥満表現型と関連づけられており、神経発生における遺伝子制御や代謝性疾患の機序を研究するうえで重要なノードとみなされています。また、発現が限局していることと上流の制御因子としての役割から、神経系の系譜アイデンティティや内分泌制御を扱うモデルにおいて、マーカーおよび機能的ドライバーとして利用する根拠にもなります。

SIM1 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なSIM1の発現上昇を可能にします。

SIM1 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、SIM1転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性SIM1の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のSIM1ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。