Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SGTA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424626
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SGTA O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SGTA, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SGTA Anticorpo (6A4): sc-130557
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SGTA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424626 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Sgta** em camundongo codifica a pequena proteína alfa contendo repetições tetratricopeptídicas ricas em glutamina (SGTA), um co-chaperona citosólico que se liga a complexos HSP70/HSP90 e reconhece proteínas cliente hidrofóbicas por meio de seus domínios TPR. A SGTA participa do controle de qualidade de proteínas recém-sintetizadas e mal localizadas, coordenando decisões de triagem entre vias de dobramento, direcionamento para membrana e degradação proteassomal. Está implicada no manuseio de proteínas ancoradas na cauda mediado por BAG6/GET e na regulação do turnover dependente de ubiquitina, conectando a SGTA à proteostase e às respostas celulares ao estresse. Vias desreguladas de homeostase proteica envolvendo a SGTA são relevantes para estudos mecanísticos de neurodegeneração, adaptação de células cancerosas ao estresse e distúrbios da biogênese de proteínas de membrana.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SGTA (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sgta em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sgta, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sgta na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SGTA.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sgta para a investigação da sinalização de SGTA, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sgta críticos para a função SGTA
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sgta para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SGTA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SGTA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sgta. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SGTA Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SGTA (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sgta para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sgta definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.