Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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SGLT-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-434235
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SGLT-2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SGLT-2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SGLT-2 Anticorpo (D-6): sc-393350
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SGLT-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-434235 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Slc5a2 codifica o cotransportador sódio–glicose SGLT-2, um transportador de alta capacidade que acopla gradientes de Na⁺ à reabsorção de glicose através da membrana apical das células epiteliais do túbulo proximal renal. Ao regular o fluxo transepitelial de glicose, o SGLT-2 influencia o balanço energético celular e a homeostase osmótica, além de interagir com processos de transporte iônico que determinam o manuseio tubular de solutos e água. Alterações na atividade de SLC5A2/SGLT-2 estão associadas à glicosúria desregulada e à homeostase sistêmica da glicose, tornando-o relevante para estudos de fenótipos metabólicos e de fisiologia renal. Em camundongos, Slc5a2 oferece um modelo tratável para investigar mecanismos de transporte de glicose e as contribuições renais às respostas ao estresse metabólico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SGLT-2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Slc5a2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Slc5a2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Slc5a2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SGLT-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Slc5a2 para a investigação da sinalização de SGLT-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Slc5a2 críticos para a função SGLT-2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Slc5a2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SGLT-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SGLT-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Slc5a2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SGLT-2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SGLT-2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Slc5a2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Slc5a2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.