SENP2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-429217

Panoramica

Senp2 codifica la proteasi 2 specifica per sentrina/SUMO (SENP2), un enzima deSUMOilante che rimuove le modificazioni SUMO per regolare la stabilità delle proteine, la localizzazione subcellulare e i programmi trascrizionali. L’attività di SENP2 modella il controllo SUMO-dipendente della progressione del ciclo cellulare, delle risposte al danno al DNA e del trasporto nucleare, influenzando nodi di segnalazione come NF-κB e le vie di stress associate a p53. Nei modelli murini, Senp2 è stato associato a fenotipi dello sviluppo e cardiovascolari ed è spesso studiato per il suo impatto su infiammazione, regolazione metabolica e omeostasi cellulare. Una funzione deregolata delle proteasi SUMO può alterare la proteostasi e processi associati alla cromatina, rilevanti per la modellizzazione delle malattie e l’analisi delle vie di segnalazione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SENP2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Senp2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Senp2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Senp2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SENP2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Senp2 per lo studio della segnalazione di SENP2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Senp2 critici per la funzione di SENP2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Senp2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SENP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal SENP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Senp2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SENP2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR SENP2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Senp2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Senp2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.