SENP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-429217

Übersicht

Senp2 kodiert die Sentrin-/SUMO-spezifische Protease 2 (SENP2), ein deSUMOylierendes Enzym, das die SUMO-Konjugation rückgängig macht und so Proteinstabilität, subzelluläre Lokalisation und Transkriptionsprogramme reguliert. Die SENP2-Aktivität prägt die SUMO-abhängige Kontrolle der Zellzyklusprogression, der DNA-Schadensantworten und des nukleären Transports und beeinflusst dabei Signalnetzwerke wie NF-κB sowie p53-assoziierte Stresswege. In Mausmodellen wurde Senp2 mit Entwicklungs- und kardiovaskulären Phänotypen in Verbindung gebracht und wird häufig hinsichtlich seiner Auswirkungen auf Entzündung, Stoffwechselregulation und zelluläre Homöostase untersucht. Eine fehlregulierte SUMO-Proteasefunktion kann die Proteostase sowie chromatinassoziierte Prozesse stören, was für Krankheitsmodelle und die Untersuchung von Signalwegen relevant ist.

Das SENP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Senp2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Senp2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Senp2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SENP2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Senp2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SENP2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Senp2-Exone abzielen, die für die SENP2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Senp2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SENP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom SENP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Senp2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SENP2 HDR-Plasmid (m) und SENP2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Senp2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Senp2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.