SCP-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423231

Descripción general

Sycp1 codifica la proteína 1 del complejo sinaptonémico (SCP-1), un componente estructural específico de la meiosis del complejo sinaptonémico que se ensambla a lo largo de los cromosomas homólogos durante la profase I. SCP-1 favorece la sinapsis cromosómica, promueve la formación de entrecruzamientos y ayuda a coordinar los eventos de recombinación y reparación del ADN necesarios para una segregación fiel en espermatocitos y ovocitos. La alteración de la sinapsis dependiente de SYCP1 se asocia con detención meiótica y formación de gametos aneuploides, por lo que es relevante para estudios de infertilidad y del desarrollo de células germinales. En el ratón, Sycp1 se utiliza ampliamente como marcador y como nodo mecanístico para analizar la progresión meiótica, la señalización de puntos de control y la integridad de las vías de recombinación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SCP-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sycp1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sycp1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sycp1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SCP-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sycp1 para la investigación de la señalización de SCP-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Sycp1 críticos para la función de SCP-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sycp1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SCP-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SCP-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sycp1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SCP-1 (m) y el plásmido HDR SCP-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sycp1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sycp1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.