SCML1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407161

概要

SCML1（sex comb on midleg-like 1）は、クロマチン依存的な転写抑制およびエピジェネティック状態の維持に関与するとされる、ポリコーム群（Polycomb group）関連タンパク質をコードします。SCMファミリーの一員として、SCML1はポリコーム抑制複合体（PRC）の生物学と関連し、ヒストン修飾マークに基づく遺伝子発現プログラムの制御に寄与することで、細胞アイデンティティや発生過程に影響を及ぼします。ポリコーム経路の活性異常は、複数の疾患状況で観察される分化の破綻やゲノム規模の転写バランス異常と広く関係しているため、SCML1はエピジェネティック制御機構を研究する上で有用な結節点となります。SCML1の解析は、クロマチン構造、転写サイレンシング、ならびに系譜特異的な遺伝子ネットワークに対する下流影響の研究を後押しします。

SCML1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSCML1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SCML1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SCML1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SCML1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SCML1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SCML1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SCML1の機能に不可欠なSCML1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SCML1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SCML1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSCML1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SCML1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SCML1 HDRプラスミド（h）および SCML1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSCML1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSCML1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。