Sc1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420099
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sc1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Sc1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SPARCL1 Anticorpo (G-5): sc-514275
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sc1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420099 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Sparcl1** de camundongo codifica **Sc1**, uma glicoproteína matricelular secretada da família **SPARC** que modula a organização da matriz extracelular (MEC) e a adesão célula–matriz. Sc1 contribui para a regulação da migração, proliferação e diferenciação celulares ao influenciar a sinalização por integrinas, a dinâmica das adesões focais e programas de remodelamento tecidual. Em contextos vasculares e estromais, **SPARCL1** está associado à regulação da angiogênese e às interações entre endotélio e músculo liso, com alterações de expressão descritas em fibrose, remodelamento associado à inflamação e na biologia do microambiente tumoral. Essas propriedades fazem de **Sparcl1** um alvo útil para estudar redes de sinalização dependentes da MEC que moldam a arquitetura tecidual e fenótipos estromais relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sc1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sparcl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sparcl1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sparcl1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sc1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sparcl1 para a investigação da sinalização de Sc1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sparcl1 críticos para a função Sc1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sparcl1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Sc1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Sc1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sparcl1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Sc1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Sc1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sparcl1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sparcl1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.