Ribosomal Protein L39 Plasmide Double Nickase (h): sc-410990-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Ribosomal Protein L39 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Ribosomal Protein L39 Double Nickase Plasmid (h) e il Ribosomal Protein L39 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RPL39. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Ribosomal Protein L39 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410990-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ribosomal Protein L39 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410990-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **RPL39** codifica la proteina ribosomiale L39, un piccolo componente basico della grande subunità ribosomiale 60S che contribuisce all’assemblaggio del ribosoma e alla traduzione stabile degli mRNA. In quanto parte del nucleo della macchina traduzionale, RPL39 influenza la capacità di sintesi proteica, il controllo di qualità co-traduzionale e programmi cellulari più ampi legati a crescita, risposte allo stress e proteostasi. La perturbazione delle proteine ribosomiali può indurre stress nucleolare e cambiamenti nei segnali a valle, inclusi checkpoint dipendenti da p53, e può alterare la selettività della traduzione per trascritti specifici. La disregolazione della biogenesi e della funzione ribosomiale è ampiamente implicata nelle ribosomopatie e nella riprogrammazione della traduzione associata al cancro, rendendo RPL39 un bersaglio rilevante per studiare come una composizione ribosomiale alterata influenzi lo stato cellulare e fenotipi associati alla malattia.
Ribosomal Protein L39 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RPL39 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RPL39. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RPL39. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RPL39 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.