Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
RFXAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406793
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RFXAP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RFXAP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RFXAP Anticorpo (RFXAD55A): sc-81368
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RFXAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406793 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RFXAP (proteína associada ao fator regulador X) é um cofator essencial do complexo transcricional RFX, que se liga ao elemento promotor X-box para impulsionar a expressão de genes do MHC de classe II. Por meio desse papel, a RFXAP apoia o processamento e a apresentação de antígenos e molda a ativação imune adaptativa ao regular programas transcricionais dependentes de CIITA. Variantes de perda de função em RFXAP interrompem a expressão do MHC de classe II e estão associadas à síndrome do linfócito nu tipo II, caracterizada por vigilância imunológica comprometida. Em sistemas modelo, a perturbação de RFXAP afeta vias responsivas a interferons, a diferenciação de células imunes e mecanismos que governam as interações hospedeiro–patógeno.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RFXAP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RFXAP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RFXAP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RFXAP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RFXAP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RFXAP para a investigação da sinalização de RFXAP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RFXAP críticos para a função RFXAP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RFXAP para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RFXAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RFXAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RFXAP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RFXAP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RFXAP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RFXAP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RFXAP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.