REEP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-432536

概要

Reep2は、受容体発現促進タンパク質2（receptor expression-enhancing protein 2：REEP2）をコードしており、REEPファミリーに属します。REEPファミリーは小胞体（ER）膜の形態形成や、細胞内輸送に影響するER–微小管相互作用の支持に関与するとされています。REEP2は膜タンパク質の取り扱いおよび神経突起に関連したERの構築に寄与し、これらは神経細胞の形態維持やプロテオスタシスの維持に重要な過程です。REEPファミリー機能の破綻は軸索の脆弱性や神経変性機構と関連づけられており、Reep2は軸索維持やストレス応答に影響する経路を研究するうえで有用な標的です。マウス系では、Reep2の攪乱を用いて、神経細胞やその他の分泌系細胞型におけるERリモデリング、オルガネラ動態、ならびに輸送依存的シグナル伝達を解析できます。

REEP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるReep2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Reep2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Reep2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、REEP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、REEP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Reep2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• REEP2の機能に不可欠なReep2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Reep2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• REEP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびREEP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Reep2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  REEP2 HDRプラスミド（m）および REEP2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはReep2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のReep2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。