PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400448

Descripción general

KLK3 codifica la peptidasa 3 relacionada con calicreínas (PSA), una proteasa serina secretada producida predominantemente por las células epiteliales luminales de la próstata y liberada al líquido seminal. La PSA participa en el procesamiento proteolítico de las proteínas del plasma seminal y contribuye a redes extracelulares de proteasas que modulan el corte de sustratos, el recambio proteico y la señalización del microambiente. Su expresión está fuertemente regulada por la señalización del receptor de andrógenos, lo que vincula la transcripción de KLK3 al control hormonal de la diferenciación del epitelio prostático y de los programas secretorios. La desregulación de la expresión de KLK3 y la actividad alterada de la PSA se asocian estrechamente con la patobiología prostática y se utilizan ampliamente como lecturas moleculares en estudios de respuesta a andrógenos, progresión tumoral y remodelación del microambiente.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KLK3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KLK3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KLK3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KLK3 para la investigación de la señalización de PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de KLK3 críticos para la función de PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KLK3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KLK3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen (h) y el plásmido HDR PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KLK3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KLK3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.