PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-400448

Übersicht

KLK3 kodiert die Kallikrein-verwandte Peptidase 3 (PSA), eine sezernierte Serinprotease, die überwiegend von luminalen Epithelzellen der Prostata produziert und in die Samenflüssigkeit abgegeben wird. PSA ist an der proteolytischen Verarbeitung von Proteinen des Samenplasmas beteiligt und trägt zu extrazellulären Protease-Netzwerken bei, die Substratspaltung, Proteinumsatz und mikroumgebungsabhängige Signalübertragung modulieren. Seine Expression wird stark durch die Androgenrezeptor-Signalgebung reguliert, wodurch die KLK3-Transkription mit der hormonellen Steuerung der epithelialen Differenzierung und sekretorischer Programme der Prostata verknüpft ist. Eine dysregulierte KLK3-Expression und veränderte PSA-Aktivität stehen in enger Verbindung mit der Pathobiologie der Prostata und werden in Studien zur Androgenantwort, Tumorprogression und zum Umbau der Mikroumgebung häufig als molekulare Readouts genutzt.

Das PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des KLK3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des KLK3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von KLK3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von KLK3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf KLK3-Exone abzielen, die für die PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere KLK3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des KLK3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen HDR-Plasmid (h) und PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von KLK3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten KLK3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.