Partículas Lentivirales de Activación (m) PRX V: sc-424925-LAC

El gen Prdx5 de ratón codifica la peroxirredoxina V (PRX V), una peroxidasa dependiente de tioles que desintoxica el peróxido de hidrógeno, los hidroperóxidos orgánicos y el peroxinitrito, ayudando a mantener la homeostasis redox celular. PRX V respalda la defensa antioxidante en distintos compartimentos y contribuye a preservar la función mitocondrial, limitar el daño oxidativo a proteínas y lípidos, y modular la señalización sensible al estado redox. Mediante la modulación de vías dependientes de ROS, PRX V puede influir en las respuestas inflamatorias, la adaptación al estrés y procesos relacionados con la apoptosis. La actividad desregulada de Prdx5/PRX V se ha asociado con fenotipos de estrés oxidativo relevantes para la neurodegeneración, la disfunción metabólica y la lesión tisular inflamatoria en modelos de investigación en ratón.

Las partículas de activación lentiviral PRX V (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Prdx5 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral PRX V (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Prdx5, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de PRX V. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Prdx5 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.