Plasmide Double Nickase (h) PRX IV: sc-402821-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PRX IV correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PRX IV Double Nickase (h) et le plasmide PRX IV Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PRDX4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PRX IV Antibody (F-2): sc-376668
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PRX IV | sc-402821-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PRX IV | sc-402821-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **PRDX4** code la **peroxyrédoxine IV (PRX IV)**, une peroxydase thiol‑dépendante de la voie sécrétoire et du réticulum endoplasmique (RE) qui réduit le peroxyde d’hydrogène et les peroxydes lipidiques afin de maintenir l’homéostasie rédox. En couplant la détoxification des peroxydes à la formation de ponts disulfure, PRX IV soutient le repliement oxydatif des protéines, la protéostasie du RE et l’atténuation de la signalisation de la réponse aux protéines mal repliées (UPR) en condition de stress oxydant. L’activité de PRDX4 s’inscrit à l’interface de voies régulées par le rédox contrôlant la sécrétion, l’inflammation et la survie cellulaire, et des modifications de son expression ou de son état d’oxydation ont été associées à des phénotypes de stress oxydant rapportés en cancérologie, dans les dysfonctions métaboliques, ainsi que dans des contextes cardiovasculaires et inflammatoires. En tant qu’enzyme rédox sécrétée/du RE, PRX IV est fréquemment étudiée pour son influence sur le tamponnement des ROS extracellulaires et luminales, ainsi que sur la modulation en aval de programmes transcriptionnels d’adaptation au stress.
PRX IV Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PRDX4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PRDX4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PRDX4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PRDX4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.