PRR14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-433320

概要

Prr14はPRR14（プロリンに富む核内タンパク質）をコードしており、核ラミナやクロマチンとの相互作用を介して核構造の編成に関与するとされています。PRR14はヘテロクロマチンを核周辺部に係留することに寄与し、エピジェネティック状態、ゲノム安定性、ならびに細胞周期に連動した核内構造変化に影響を与えます。核ラミナ―クロマチン接触の制御異常は、分化プログラムの破綻や異常な増殖シグナルと関連づけられており、PRR14は核膜依存的な遺伝子制御を研究するうえで有用な結節点となります。マウス系では、Prr14の改変により、空間的なゲノム配置が転写制御やストレス応答経路とどのように接続しているかを検討できます。

PRR14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるPrr14遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Prr14内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Prr14のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PRR14タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PRR14シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Prr14欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PRR14の機能に不可欠なPrr14エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Prr14ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PRR14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびPRR14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Prr14遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PRR14 HDRプラスミド（m）および PRR14 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPrr14ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPrr14標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。