PRR14 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433320

Descripción general

Prr14 codifica PRR14, una proteína nuclear rica en prolina implicada en la organización de la arquitectura nuclear mediante interacciones con la lámina nuclear y la cromatina. PRR14 contribuye a anclar la heterocromatina a la periferia nuclear, influyendo en el estado epigenético, la estabilidad del genoma y los cambios en la organización nuclear ligados al ciclo celular. La regulación alterada de los contactos entre la lámina nuclear y la cromatina se ha asociado con defectos en los programas de diferenciación y señales proliferativas aberrantes, lo que convierte a PRR14 en un punto útil para estudiar la regulación génica dependiente de la envoltura nuclear. En sistemas murinos, la perturbación de Prr14 puede ayudar a investigar cómo la organización espacial del genoma se integra con el control transcripcional y las vías de respuesta al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PRR14 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Prr14 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Prr14 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Prr14 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PRR14.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Prr14 para la investigación de la señalización de PRR14, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Prr14 críticos para la función de PRR14
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Prr14 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PRR14 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido PRR14 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Prr14. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PRR14 (m) y el plásmido HDR PRR14 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Prr14 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Prr14 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.