Plasmide Double Nickase (r) PRL: sc-437302-NIC
- Espèces cibles: rat
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (r) PRL correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PRL Double Nickase (r) et le plasmide PRL Double Nickase (r2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant . Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (r) PRL | sc-437302-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (r2) PRL | sc-437302-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La prolactine (PRL) est une hormone peptidique pléiotrope surtout connue pour réguler la lactation et le développement de la glande mammaire, tout en influençant également la reproduction, l’homéostasie métabolique et la modulation immunitaire chez les rongeurs. La PRL transmet ses signaux principalement via le récepteur de la prolactine, activant des programmes transcriptionnels JAK2/STAT5 et interagissant avec les voies PI3K/AKT et MAPK, ce qui façonne la survie cellulaire, la différenciation et la fonction sécrétoire. En physiologie du rat, les altérations de la signalisation de la PRL sont souvent étudiées dans le contexte de la régulation de l’axe hypothalamo-hypophysaire, du contrôle endocrinien sensible au stress et du remodelage tissulaire. Une activité dérégulée de la voie de la PRL est pertinente dans des modèles expérimentaux d’hyperprolactinémie, d’infertilité, de biologie des lactotrophes hypophysaires et de phénotypes prolifératifs de la glande mammaire.
PRL Le plasmide double nickase (r) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus dans les lignées cellulaires rat. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de . Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de . En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de .
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.