PRKCDBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407370

概要

PRKCDBP（protein kinase C delta binding protein）は細胞質に存在するアダプタータンパク質で、PKCδ関連シグナル伝達に関与し、細胞周期の進行、アポトーシス、ストレス応答を制御するリン酸化依存性経路に影響を与えます。本タンパク質は、転写プログラムの調節やチェックポイント制御の修飾とも関連づけられており、細胞の増殖や生存の意思決定を形作るキナーゼカスケードからの上流シグナルを統合します。PRKCDBPの発現変動は複数の腫瘍コンテキストで報告されており、増殖制御機構、DNA損傷応答、腫瘍抑制因子関連ネットワークにおける役割の解明に向けて研究対象となっています。これらの特性により、PRKCDBPはヒト細胞モデルにおけるシグナル伝達依存性やコンテキスト特異的表現型を解析するうえで重要な標的です。

PRKCDBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPRKCDBP遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PRKCDBP内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PRKCDBPのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PRKCDBPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PRKCDBPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PRKCDBP欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PRKCDBPの機能に不可欠なPRKCDBPエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PRKCDBPゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PRKCDBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPRKCDBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PRKCDBP遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PRKCDBP HDRプラスミド（h）および PRKCDBP HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPRKCDBPホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPRKCDBP標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。