PP1γ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2): sc-422379-KO-2

Übersicht

Ppp1cc kodiert die Maus-Proteinphosphatase 1 Gamma (PP1γ), eine katalytische Serin/Threonin-Phosphatase, die phosphorylierungsabhängige Signalwege durch Dephosphorylierung vielfältiger Substrate im Zellkern und im Zytoplasma steuert. PP1γ wirkt in Multiprotein-Holoenzymen, die die Spezifität auf Prozesse wie Zellzyklusprogression, Chromatindynamik, RNA-Prozessierung und Zytoskelett-Remodelling ausrichten. Über diese Signalwege trägt PP1γ zur Regulation des mitotischen Austritts, von DNA-Schadensantworten und zellulären Differenzierungsprogrammen bei. Dysregulierte Signalübertragung der PP1-Familie und eine veränderte Phosphorylierungshomöostase sind mit Mechanismen verknüpft, die für proliferative Erkrankungen, genomische Instabilität und die Neurobiologie relevant sind, was ihren Einsatz in pfadfokussierten Funktionsstudien unterstützt.

Das PP1γ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Ppp1cc-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Ppp1cc-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Ppp1cc nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PP1γ-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Ppp1cc-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PP1γ-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Ppp1cc-Exone abzielen, die für die PP1γ-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Ppp1cc-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PP1γ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom PP1γ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Ppp1cc-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PP1γ HDR-Plasmid (m) und PP1γ HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Ppp1cc-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Ppp1cc-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.