PLRP2 Double Nickase Plasmid (h): sc-409664-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das PLRP2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- PLRP2 Double-Nickase-Plasmid (h) und PLRP2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf PNLIPRP2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: PLRP2: sc-376236
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
PLRP2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-409664-NIC | 20 µg | $410.00 |
PNLIPRP2 kodiert das pankreatische Lipase‑verwandte Protein 2 (PLRP2), eine sekretierte Lipase, die zur Hydrolyse von Nahrungs‑Triacylglycerolen und verwandten Lipiden im Darmlumen beiträgt. PLRP2 ist an Verdauungs- und Stoffwechselprozessen beteiligt, die die intestinale Lipidaufnahme, die nachgelagerte Chylomikronenbildung und die systemische Energiehomöostase beeinflussen. Unterschiede in der Aktivität verdauungsrelevanter Lipasen sind für Studien zu Malabsorptionsphänotypen und metabolischer Dysregulation relevant; zudem wird PLRP2 häufig zusammen mit anderen pankreatischen Enzymen untersucht, um die koordinierte exokrine Pankreasfunktion zu verstehen. In der biomedizinischen Forschung stellt PNLIPRP2 einen gut untersuchbaren Ansatzpunkt dar, um die Lipidverarbeitung an der Schnittstelle von Darm und Pankreas sowie die Folgen einer veränderten luminalen Lipolyse für inflammatorische und metabolische Signalwege zu untersuchen.
PLRP2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des PNLIPRP2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von PNLIPRP2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die PNLIPRP2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit PNLIPRP2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.