Plasmide Double Nickase (h) PKDCC: sc-410480-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PKDCC correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PKDCC Double Nickase (h) et le plasmide PKDCC Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PKDCC. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PKDCC Antibody (G-10): sc-514504
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PKDCC | sc-410480-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PKDCC | sc-410480-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PKDCC (protein kinase domain containing, cytoplasmic) code une sérine/thréonine kinase atypique, souvent appelée VLK/PKDCC, qui se localise dans la voie sécrétoire et contribue à la phosphorylation de protéines extracellulaires et associées à la matrice. En régulant la sécrétion protéique et les modifications post-traductionnelles, PKDCC influence les interactions cellule–matrice, la morphogenèse tissulaire et des programmes de signalisation liés au développement et à la différenciation. Des études génétiques et d’expression ont associé PKDCC à des phénotypes développementaux et à un remodelage dérégulé de la matrice extracellulaire, ce qui appuie sa pertinence pour la recherche en biologie squelettique, en organogenèse et sur des mécanismes de maladie impliquant une signalisation sécrétoire altérée.
PKDCC Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PKDCC dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PKDCC. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PKDCC. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PKDCC.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.