periaxin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404868
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- periaxin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico periaxin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:periaxin Anticorpo (G-5): sc-515672
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
periaxin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404868 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PRX codifica a periaxina, uma proteína de ancoragem (scaffolding) enriquecida em células de Schwann, essencial para a estabilidade e a manutenção da mielina nos nervos periféricos. A periaxina participa da organização do citoesqueleto e da arquitetura de domínios de membrana, sustentando o alongamento das células de Schwann e a formação de complexos associados à mielina que regulam as interações entre axônio e glia. A disrupção de PRX compromete a homeostase da mielina e a condução nervosa, relacionando alterações na função da periaxina a neuropatias periféricas hereditárias, incluindo a doença de Charcot–Marie–Tooth tipo 4F e fenótipos semelhantes à síndrome de Dejerine–Sottas. Consequentemente, PRX é amplamente estudado em vias que controlam a mielinização, a diferenciação de células de Schwann e respostas ao estresse que influenciam a integridade do nervo periférico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO periaxin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PRX em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PRX, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PRX na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína periaxin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PRX para a investigação da sinalização de periaxin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PRX críticos para a função periaxin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PRX para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo periaxin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo periaxin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PRX. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo periaxin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR periaxin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PRX para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PRX definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.