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PDE7B慢病毒激活颗粒(h) | sc-411961-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 PDE7B 基因编码磷酸二酯酶 7B(PDE7B),这是一种 cAMP 特异性酶,可将环磷酸腺苷(cAMP)水解为 5′-AMP,从而调控 PKA 和 EPAC 依赖性信号的幅度与持续时间。通过控制细胞内 cAMP 库,PDE7B 在免疫系统与神经系统等背景下影响转录程序、细胞存活与分化,并与 GPCR 驱动的信号网络发生交叉。围绕 cAMP 稳态这一关键调控节点,PDE7B 表达或活性异常已在炎症信号、神经递质传递以及血液与神经系统疾病的生物学研究中受到关注。因此,PDE7B 可作为一种有用的遗传切入点,用于在机制性细胞模型中解析第二信使信号及通路串扰。
PDE7B 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PDE7B 表达。
PDE7B 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在PDE7B转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性PDE7B表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 PDE7B 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。