PDE2A Lentiviral Activation Particles (h): sc-401957-LAC

Das humane Gen **PDE2A** kodiert die Phosphodiesterase 2A, eine Dual-Substrat-Phosphodiesterase für zyklische Nukleotide, die sowohl cAMP als auch cGMP hydrolysiert und dadurch Amplitude und Kompartimentierung von Second-Messenger-Signalen prägt. PDE2A wird durch die Bindung von cGMP an seine regulatorische GAF-Domäne stimuliert, was ein cGMP-zu-cAMP-Cross-Talk ermöglicht, der die PKA/PKG-Signalgebung, die Aktivität von Ionenkanälen und phosphorylierungsabhängige transkriptionelle Antworten beeinflusst. Durch die Kontrolle der zyklischen Nukleotid-Signalübertragung trägt PDE2A zur neuronalen Erregbarkeit und synaptischen Plastizität sowie zu kardiovaskulären und inflammatorischen Signalprogrammen bei. Eine veränderte PDE2A-Expression oder -Aktivität wurde mit der Biologie neuropsychiatrischer und neurodegenerativer Erkrankungen sowie mit einer dysregulierten kardiometabolischen Signalgebung in Verbindung gebracht, was ihre Eignung als Knotenpunkt in Signalwegen für mechanistische Forschung unterstreicht.

PDE2A Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PDE2A-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PDE2A Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PDE2A-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PDE2A-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PDE2A-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.