PCYOX1 Plasmide Double Nickase (h): sc-407075-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PCYOX1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PCYOX1 Double Nickase Plasmid (h) e il PCYOX1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PCYOX1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: PCYOX1 Antibody (25): sc-136391
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PCYOX1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407075-NIC | 20 µg | $410.00 |
PCYOX1 codifica la prenilcisteina ossidasi 1, un’ossidasi flavino-dipendente che catalizza la scissione ossidativa dei residui di prenilcisteina generati durante il turnover delle proteine prenilate. Elaborando i metaboliti della cisteina prenilata, PCYOX1 contribuisce all’omeostasi lipidica e redox e si collega a vie associate al traffico di membrana e alla proteostasi. Un’alterazione dell’attività di PCYOX1 è stata associata a fenotipi di stress ossidativo e alla segnalazione infiammatoria, rendendola rilevante per studi sulla disfunzione metabolica e sulla biologia vascolare. Nelle cellule umane, la perturbazione di PCYOX1 rappresenta un punto di accesso gestibile per esaminare come i sottoprodotti della prenilazione influenzino la gestione delle specie reattive dell’ossigeno e le successive vie di risposta allo stress.
PCYOX1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PCYOX1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PCYOX1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PCYOX1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PCYOX1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.