PARD3B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406097

Visão geral

PARD3B (regulador beta da polaridade celular da família PAR-3) é uma proteína de suporte (scaffold) que contribui para o estabelecimento e a manutenção da polaridade apical–basal em células epiteliais ao organizar complexos de polaridade nas junções estreitas (tight junctions). Ela atua em redes de polaridade conservadas envolvendo proteínas PAR e sinalização por pequenas GTPases para coordenar a localização assimétrica de proteínas, a integridade das junções e a organização do citoesqueleto. Por meio desses processos, PARD3B influencia a migração celular, a arquitetura tecidual e a compartimentalização da sinalização, o que pode modular programas de proliferação e diferenciação. A desregulação de reguladores de polaridade, incluindo vias associadas a PARD3B, é frequentemente estudada no contexto de desorganização epitelial, fenótipos relacionados à invasão e outros estados celulares relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PARD3B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PARD3B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PARD3B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PARD3B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PARD3B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PARD3B para a investigação da sinalização de PARD3B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PARD3B críticos para a função PARD3B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PARD3B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PARD3B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PARD3B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PARD3B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PARD3B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PARD3B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PARD3B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PARD3B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.