Plásmido Doble Nickase (h) PANK2: sc-405120-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PANK2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PANK2 (h) y el plásmido de doble nickasa PANK2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PANK2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PANK2 | sc-405120-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PANK2 | sc-405120-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La pantotenato quinasa 2 (PANK2) es una enzima mitocondrial que cataliza el primer paso, limitante de la velocidad, en la biosíntesis de coenzima A (CoA) a partir de pantotenato, acoplando la disponibilidad de vitamina B5 a la producción celular de acil-CoA y al metabolismo energético. Al regular los reservorios de CoA, PANK2 influye en la función mitocondrial, el metabolismo lipídico y la homeostasis redox, con efectos posteriores en rutas como la β-oxidación de ácidos grasos y el ciclo del TCA. La desregulación de la actividad o la expresión de PANK2 se asocia con una alteración del flujo metabólico y con estrés mitocondrial, y PANK2 se estudia ampliamente en el contexto de la neurodegeneración y de fenotipos relacionados con el manejo del hierro, incluida la neurodegeneración asociada a la pantotenato quinasa (PKAN). Estas características hacen de PANK2 un objetivo útil para investigar el control metabólico mitocondrial y la señalización sensible al estrés en sistemas celulares humanos.
PANK2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PANK2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PANK2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PANK2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PANK2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.