Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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p120 Plasmide Double Nickase (h): sc-400943-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- p120 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il p120 Double Nickase Plasmid (h) e il p120 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CTNND1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: p120 Antibody (6H11): sc-23873
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
p120 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400943-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
p120 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400943-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTNND1 codifica la p120-catenina (p120), una proteina a ripetizioni armadillo che si lega alle caderine classiche e le stabilizza nelle giunzioni aderenti, regolando l’adesione cellula-cellula e l’integrità della barriera epiteliale. Modulando il turnover delle caderine, p120 influenza il rimodellamento delle giunzioni, la dinamica del citoscheletro e la segnalazione delle GTPasi della famiglia Rho, che coordinano polarità e motilità cellulari. CTNND1 interagisce inoltre con le vie Wnt/β-catenina e con percorsi responsivi ai fattori di crescita attraverso il suo ruolo nell’omeostasi delle giunzioni aderenti e nella regolazione trascrizionale mediata da Kaiso. La deregolazione della funzione di CTNND1/p120 e le alterazioni della segnalazione giunzionale sono associate a un’organizzazione epiteliale anomala e a fenotipi invasivi, oggetto di studio sia in biologia dei tumori sia nei disturbi dello sviluppo.
p120 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CTNND1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CTNND1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CTNND1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CTNND1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.