Nup153 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-403206-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nup153 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Nup153, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Nup153 Anticorpo (R3G1): sc-101544
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nup153 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-403206-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
NUP153 codifica a Nup153, uma nucleoporina estrutural do complexo do poro nuclear que se localiza no cesto nuclear e ajuda a organizar o transporte nucleocitoplasmático. A Nup153 contribui para a importação/exportação nuclear ao coordenar o tráfego dependente de carioferinas e também interage com a cromatina na periferia nuclear, influenciando a regulação gênica e a organização do genoma em níveis superiores. Por meio de funções na arquitetura do envelope nuclear, na progressão do ciclo celular e na remontagem mitótica dos poros nucleares, a Nup153 afeta vias que governam programas de transcrição e o processamento de RNA. A desregulação do transporte nuclear e de componentes do complexo do poro, incluindo NUP153, está associada à instabilidade genômica e a sinalização aberrante observadas em diversos contextos de doença, tornando-o um alvo relevante para estudos mecanísticos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nup153 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NUP153 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NUP153, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NUP153 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nup153.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NUP153 para a investigação da sinalização de Nup153, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NUP153 críticos para a função Nup153
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NUP153 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Nup153 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Nup153 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NUP153. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Nup153 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Nup153 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NUP153 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NUP153 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.