NTR2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405783

Descripción general

El receptor 2 de neurotensina (NTSR2, NTR2) es un receptor acoplado a proteína G de clase A que se une al neuropéptido neurotensina y se acopla predominantemente a Gαq/11 para estimular la señalización de la fosfolipasa C, la movilización de calcio intracelular y cascadas de quinasas aguas abajo como PKC–MAPK/ERK. La señalización de NTR2 influye en la excitabilidad neuronal, la transmisión sináptica y las respuestas neuroendocrinas, y puede modular la comunicación cruzada con las vías de dopamina y glutamato que dan forma a la actividad a nivel de circuitos. En contextos no neuronales, la expresión de NTSR2 se ha relacionado con la señalización inflamatoria y las respuestas de estrés celular, lo que respalda su relevancia para estudios de neuroinflamación y remodelación tisular. La actividad desregulada del eje neurotensina–NTR2 se ha investigado en la biología de enfermedades neurológicas y neuropsiquiátricas y en mecanismos que contribuyen a alteraciones de la proliferación y la supervivencia celulares en modelos asociados a enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NTR2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NTSR2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NTSR2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NTSR2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NTR2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NTSR2 para la investigación de la señalización de NTR2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NTSR2 críticos para la función de NTR2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NTSR2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NTR2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NTR2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NTSR2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NTR2 (h) y el plásmido HDR NTR2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NTSR2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NTSR2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.