NPDC-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412710

概要

NPDC1（neural proliferation, differentiation and control protein 1）は、神経系の環境で高発現する細胞質タンパク質NPDC-1をコードしており、細胞周期進行や分化プログラムの制御との関連が示されています。NPDC-1は、核内受容体やその他の制御因子との相互作用を介して転写ネットワークを調節し、増殖から分化への移行や神経突起に関連する表現型に影響を及ぼすことが報告されています。これらの役割と整合的に、NPDC1の発現変動は、神経生物学的に関連するモデルにおいて増殖制御や細胞成熟状態の変化と関連づけられています。そのためNPDC1は、細胞周期の抑制、系譜決定、状況依存的な増殖制御を司る経路の一部として研究されており、神経発生および腫瘍生物学研究への示唆を有します。

NPDC-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNPDC1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NPDC1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NPDC1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NPDC-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NPDC-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NPDC1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NPDC-1の機能に不可欠なNPDC1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NPDC1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NPDC-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNPDC-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NPDC1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NPDC-1 HDRプラスミド（h）および NPDC-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNPDC1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNPDC1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。