Plásmido Doble Nickase (m) Notum: sc-429545-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Notum consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Notum (m) y el plásmido de doble nickasa Notum (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Notum. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Notum | sc-429545-NIC | 20 µg | $410.00 |
El Notum de ratón codifica una carboxilesterasa secretada que desacetila (desacila) ligandos Wnt, antagonizando así la señalización canónica Wnt/β-catenina y modulando el patrón tisular y programas de transcripción asociados a células madre. Al limitar la interacción de Wnt con sus receptores mediante la eliminación de la modificación por palmitoleato, Notum contribuye al control de retroalimentación extracelular de los gradientes de morfógenos e influye en decisiones de destino celular durante el desarrollo y la homeostasis de tejidos en el adulto. La actividad alterada de NOTUM se ha relacionado con una salida desregulada de la vía Wnt en contextos como el remodelado óseo, la regulación metabólica y la biología tumoral, lo que lo convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de procesos dependientes de Wnt. En modelos murinos, la perturbación de Notum permite investigar el crosstalk entre vías que afecta a la proliferación, la diferenciación y la señalización del nicho.
Notum El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Notum en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Notum. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Notum. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Notum alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.