Noggin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-402090-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Noggin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Noggin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Noggin Anticorpo (2C10): sc-293439
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Noggin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-402090-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O NOG codifica a noggin, uma glicoproteína secretada que se liga e neutraliza ligantes de BMP (notadamente BMP2, BMP4 e BMP7), ajustando assim os gradientes de sinalização da superfamília BMP/TGF-β durante o desenvolvimento e a homeostase tecidual no adulto. Ao antagonizar a ativação dos receptores de BMP e a fosforilação a jusante de SMAD1/5/8, a noggin influencia decisões de destino celular, a diferenciação osteogênica e condrogênica e processos de padronização em linhagens mesenquimais e neurais. Alterações na atividade de NOG estão associadas a uma morfogênese esquelética e formação articular desreguladas, sendo frequentemente estudadas em contextos que envolvem remodelamento e diferenciação aberrantes dirigidos por BMP. Como um modulador extracelular-chave da sinalização por morfógenos, a noggin é relevante para investigações em biologia do desenvolvimento, biologia do osso e da cartilagem e para o crosstalk de vias com programas de WNT e FGF.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Noggin (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NOG em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NOG, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NOG na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Noggin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NOG para a investigação da sinalização de Noggin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NOG críticos para a função Noggin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NOG para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Noggin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Noggin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NOG. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Noggin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Noggin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NOG para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NOG definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.