NIPP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406193

Übersicht

PPP1R8 kodiert den nukleären Inhibitor der Proteinphosphatase 1 (NIPP1), eine multifunktionale regulatorische Untereinheit, die die PP1-abhängige Dephosphorylierung im Zellkern moduliert. NIPP1 ist an der Kontrolle transkriptioneller Programme, am prä‑mRNA‑Spleißen sowie an zellzyklusgekoppelten Chromatinprozessen beteiligt, indem es die Phosphataseaktivität mit RNA‑ und chromatinassoziierten Komplexen koordiniert. Über diese Funktionen trägt PPP1R8 zur Aufrechterhaltung der Genauigkeit nukleärer Signalübertragung und von genomischen Regulationszuständen bei, die Proliferation und Stressantworten beeinflussen. Eine veränderte Regulation der PP1‑Signalgebung und nukleärer Phospho‑Kontrollwege unter Beteiligung von NIPP1 wurde in Zusammenhängen untersucht, die für die Tumorbiologie und andere Erkrankungen mit fehlreguliertem Wachstum und Differenzierung relevant sind.

Das NIPP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PPP1R8-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PPP1R8-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PPP1R8 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die NIPP1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PPP1R8-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der NIPP1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PPP1R8-Exone abzielen, die für die NIPP1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PPP1R8-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom NIPP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom NIPP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PPP1R8-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das NIPP1 HDR-Plasmid (h) und NIPP1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PPP1R8-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PPP1R8-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.