Plásmido Doble Nickase (h) NFRκB: sc-407203-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)NFRκB consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa NFRκB (h) y el plásmido de doble nickasa NFRκB (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NFRKB. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NFRκB Anticuerpo (A-12): sc-514977
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) NFRκB | sc-407203-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) NFRκB | sc-407203-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NFRKB (proteína de unión al ADN relacionada con el factor nuclear kappa-B) codifica un factor de unión al ADN identificado originalmente por sus interacciones con elementos reguladores de NF-κB y se ha implicado en programas de control transcripcional vinculados a la organización de la cromatina. Se ha informado que la proteína es un componente asociado a complejos de remodelación de la cromatina dependientes de ATP, lo que respalda funciones en la regulación de la expresión génica, el mantenimiento del genoma y procesos nucleares acoplados al ciclo celular. A través de sus conexiones con circuitos transcripcionales adyacentes a NF-κB, NFRKB se estudia en contextos en los que la señalización inflamatoria se cruza con la remodelación nuclear y las respuestas al estrés. La regulación alterada de la cromatina y las salidas transcripcionales relacionadas con NF-κB se exploran con frecuencia en biología del cáncer y en modelos de enfermedades asociadas al sistema inmunitario, lo que convierte a NFRKB en un nodo útil para estudios mecanísticos de la transcripción y la regulación nuclear.
NFRκB El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NFRKB en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NFRKB. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NFRKB. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NFRKB alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.