neuropilin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421964
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- neuropilin-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico neuropilin-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:neuropilin-1 Anticorpo (A-12): sc-5307
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
neuropilin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421964 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O Nrp1 de camundongo codifica a neuropilina-1, um correceptor transmembrana multifuncional que se liga a semaforinas de classe 3 e a ligantes da família VEGF para modular a orientação axonal, o brotamento angiogênico e o comportamento das células endoteliais “tip”. A neuropilina-1 coordena a sinalização com VEGFR2, plexinas e integrinas, influenciando a dinâmica do citoesqueleto, a migração celular e a permeabilidade vascular por meio de vias que incluem as redes PI3K/AKT, MAPK/ERK e de GTPases Rho. Em compartimentos imunes e estromais, a NRP1 contribui para o tráfego celular e o remodelamento tecidual, relacionando-se a microambientes inflamatórios e a processos do desenvolvimento. A atividade desregulada de NRP1 tem sido associada a padrões vasculares aberrantes e à angiogênese associada a tumores, tornando-a um alvo frequentemente estudado na biologia neurovascular e de microambientes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO neuropilin-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nrp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nrp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nrp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína neuropilin-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nrp1 para a investigação da sinalização de neuropilin-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nrp1 críticos para a função neuropilin-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nrp1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo neuropilin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo neuropilin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nrp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo neuropilin-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR neuropilin-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nrp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nrp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.