Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (m) Nek2: sc-421853-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Nek2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Nek2 Double Nickase (m) et le plasmide Nek2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nek2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Nek2 Antibody (D-8): sc-55601
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Nek2 | sc-421853-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Nek2 | sc-421853-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Nek2 (NIMA-related kinase 2) est une kinase sérine/thréonine qui coordonne la séparation des centrosomes, l’assemblage du fuseau bipolaire et la ségrégation fidèle des chromosomes au cours de la mitose. Dans les cellules de souris, l’activité de Nek2 s’intègre au contrôle du cycle cellulaire et au point de contrôle du fuseau en régulant des composants centrosomiques et la dynamique des microtubules, influençant ainsi la progression en G2/M et la fidélité mitotique. Une expression ou une activité kinase de Nek2 dérégulée est associée à l’amplification des centrosomes, à l’aneuploïdie et à l’instabilité génomique, des processus fréquemment étudiés dans des modèles de troubles prolifératifs et neurodéveloppementaux. En tant que kinase associée au centrosome, Nek2 est couramment étudiée dans les voies qui régissent l’entrée en mitose, l’organisation du fuseau et le couplage entre cils et cycle cellulaire.
Nek2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nek2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nek2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nek2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nek2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.