NDRG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421841

概要

Ndrg1は、細胞質タンパク質であるNDRG1をコードする遺伝子であり、細胞ストレスや分化シグナルによって誘導され、細胞増殖、系譜決定、低酸素応答の制御に寄与します。マウス細胞では、NDRG1は鉄恒常性、小胞輸送、細胞骨格の組織化を司る経路との関連が示されており、状況に応じて増殖や運動性プログラムに異なる影響を及ぼすことが報告されています。さらにNDRG1は末梢神経系におけるミエリン生物学とも関連し、神経変性や脱髄性ニューロパチーのモデルで研究されてきました。加えて、Ndrg1発現の変化は腫瘍生物学や転移関連表現型の文脈でも検討されており、シグナル伝達およびストレス適応の研究における重要性が支持されています。

NDRG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNdrg1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ndrg1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ndrg1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NDRG1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NDRG1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ndrg1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NDRG1の機能に不可欠なNdrg1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ndrg1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NDRG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNDRG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ndrg1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NDRG1 HDRプラスミド（m）および NDRG1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNdrg1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNdrg1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。