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myopalladin双切口酶质粒(h) | sc-417221-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
myopalladin双切口酶质粒(h2) | sc-417221-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 MYPN 基因编码肌节结构蛋白 myopalladin(肌桩蛋白),这是一种富集于 Z 盘和 I 带的肌节支架蛋白,在这些区域组织与肌动蛋白相关的结构,并为横纹肌提供机械稳定性。通过与细胞骨架及信号转导伙伴蛋白的相互作用,myopalladin 参与肌原纤维发生、肌节维持以及机械信号转导通路,将收缩活动与细胞核内的基因表达程序相耦联。MYPN 功能异常与遗传性心肌病和肌病相关,因此是研究肌肉结构、应激反应性重塑以及下游转录适应的重要靶点。
myopalladin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MYPN 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MYPN内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MYPN的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MYPN基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。