Myf-6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421777

Descripción general

Myf6 (Myf-6; también conocido como MRF4) codifica un factor de transcripción básico hélice-bucle-hélice dentro de la red de factores reguladores miogénicos que orquesta la especificación del linaje del músculo esquelético y la diferenciación terminal. Myf-6 participa en la maduración de los mioblastos, el mantenimiento de los miotubos y la expresión génica de las fibras musculares mediante interacciones cooperativas y parcialmente redundantes con MYOD1, MYF5 y MYOG, influyendo en programas transcripcionales vinculados al ensamblaje del sarcómero y a la remodelación metabólica. En el ratón, Myf6 se utiliza ampliamente para estudiar la miogénesis durante el desarrollo y en el adulto, la adaptación neuromuscular y la regulación del tipo de fibra, así como los mecanismos de debilidad y degeneración muscular en modelos genéticos y de lesión. La alteración de la transcripción regulada por Myf6 proporciona un punto de entrada abordable para diseccionar circuitos de regulación génica miogénica y el control dependiente de la cromatina de la identidad muscular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Myf-6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Myf6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Myf6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Myf6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Myf-6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Myf6 para la investigación de la señalización de Myf-6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Myf6 críticos para la función de Myf-6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Myf6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Myf-6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Myf-6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Myf6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Myf-6 (m) y el plásmido HDR Myf-6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Myf6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Myf6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.