MRVI1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411458

Descripción general

MRVI1 (homólogo 1 del sitio de integración del retrovirus murino) codifica una proteína andamiaje citoplasmática que acopla la señalización de óxido nítrico/cGMP con la regulación del calcio intracelular, en particular mediante su interacción con ITPR1 y la modulación de la liberación de Ca2+ dependiente del receptor de IP3. Participa en la vía de PKG y contribuye a la relajación del músculo liso, la función plaquetaria y un control más amplio de la dinámica de señalización impulsada por Ca2+. La señalización dependiente de MRVI1 afecta procesos celulares como la contracción, la secreción y la excitabilidad al ajustar la integración de segundos mensajeros en el retículo endoplásmico. La disregulación de las vías de Ca2+ y cGMP asociadas a MRVI1 se ha implicado en fenotipos cardiovasculares y hematológicos, y es relevante para estudios mecanísticos de alteraciones de la señalización observadas en el cáncer y otras enfermedades complejas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MRVI1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MRVI1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MRVI1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MRVI1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MRVI1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MRVI1 para la investigación de la señalización de MRVI1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MRVI1 críticos para la función de MRVI1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MRVI1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MRVI1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MRVI1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MRVI1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MRVI1 (h) y el plásmido HDR MRVI1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MRVI1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MRVI1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.