Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
MRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421714
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MRG1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MRG1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MRG1 Anticorpo (JA22): sc-21795
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421714 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cited2 codifica o correagulador transcricional MRG1, uma proteína nuclear que se liga a CBP/p300 e modula programas de expressão gênica que controlam a proliferação, a diferenciação e as respostas celulares ao estresse em células de camundongo. Ao integrar sinais de fatores de transcrição responsivos à hipóxia e de fatores do desenvolvimento, o MRG1 influencia os resultados transcricionais dependentes de HIF e uma regulação mais ampla da especificação de linhagem mediada pela cromatina. A atividade de Cited2 está ligada à embriogênese e à organogênese, e a regulação alterada dessa via tem sido associada a defeitos no desenvolvimento cardiovascular e hematopoético. Como regulador dependente do contexto de redes transcricionais, Cited2 é frequentemente estudado em modelos de inflamação, estresse metabólico e biologia tumoral, nos quais a disponibilidade de coativadores e a sinalização hipóxica moldam decisões de destino celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MRG1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cited2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cited2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cited2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MRG1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cited2 para a investigação da sinalização de MRG1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cited2 críticos para a função MRG1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cited2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo MRG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cited2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MRG1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR MRG1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cited2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cited2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.