MOS CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406911

概要

ヒトMOSは、減数分裂におけるMAPK/ERKカスケードの活性化を介した細胞周期制御で最もよく知られる、セリン/スレオニン型プロテインキナーゼMosをコードしています。MosはMEK1/2およびERK1/2の上流で機能し、生殖細胞の文脈において、細胞質静止因子（cytostatic factor）活性、紡錘体ダイナミクス、M期進行の協調に寄与します。また、MAPKシグナル伝達におけるフィードバック制御のモデル調節因子としても用いられてきました。MOSの発現やキナーゼ活性の異常は、実験系において増殖シグナルの変化や形質転換様の表現型と関連づけられており、MAPK経路の配線や細胞周期チェックポイントの研究における重要性を支持しています。これらの特性により、MOSはキナーゼ駆動型シグナルネットワークと、その下流の転写応答および細胞骨格出力を解析するための有用な標的となります。

MOS CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMOS遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MOS内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MOSのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MOSタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MOSシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MOS欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MOSの機能に不可欠なMOSエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MOSゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MOS CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMOS CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MOS遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MOS HDRプラスミド（h）および MOS HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMOSホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMOS標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。