MOS CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406911

Übersicht

Das humane MOS-Gen kodiert Mos, eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die vor allem für ihre Rolle in der Kontrolle des meiotischen Zellzyklus durch Aktivierung der MAPK/ERK-Kaskade bekannt ist. Mos wirkt upstream von MEK1/2 und ERK1/2 und trägt in Keimzellkontexten zur Koordination der Aktivität des zytostatischen Faktors, der Spindeldynamik und des Fortschreitens durch die M-Phase bei; zudem wurde es als Modellregulator für Rückkopplungsmechanismen in der MAPK-Signalübertragung genutzt. Eine fehlregulierte MOS-Expression oder Kinaseaktivität wurde in experimentellen Systemen mit veränderter proliferativer Signalgebung und transformationsähnlichen Phänotypen in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für die Untersuchung der Verschaltung des MAPK-Signalwegs und von Zellzyklus-Checkpoints unterstreicht. Diese Eigenschaften machen MOS zu einem geeigneten Ziel, um kinasegetriebene Signalnetzwerke sowie deren nachgeschaltete transkriptionelle und zytoskelettale Effekte zu analysieren.

Das MOS CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MOS-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MOS-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MOS nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MOS-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MOS-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MOS-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MOS-Exone abzielen, die für die MOS-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MOS-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MOS CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MOS CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MOS-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MOS HDR-Plasmid (h) und MOS HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MOS-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MOS-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.