Mnt Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421684
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Mnt O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Mnt, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Mnt Anticorpo (F-11): sc-376708
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Mnt Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421684 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Mnt (repressores transcricionais da rede Max) é um fator do tipo hélice–alça–hélice básico com zíper de leucina que forma heterodímeros com MAX para se ligar a elementos E-box e reprimir a transcrição, contrabalançando a ativação gênica impulsionada por MYC. Em células de camundongo, Mnt ajuda a coordenar a progressão do ciclo celular, a diferenciação, o metabolismo e as respostas ao estresse por meio da regulação de alvos da rede MYC/MAX e de complexos correpressores associados à cromatina. Ao restringir programas transcricionais proliferativos e influenciar vias de biogênese mitocondrial e de ribossomos, Mnt sustenta a homeostase celular sob estímulos mitogênicos. Alterações na atividade de MNT ou desequilíbrios na rede MYC–MAX–MNT têm sido associados à desregulação do controle de crescimento e à biologia tumoral, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de circuitos transcricionais oncogênicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Mnt (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Mnt em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Mnt, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Mnt na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Mnt.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Mnt para a investigação da sinalização de Mnt, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Mnt críticos para a função Mnt
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Mnt para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Mnt Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Mnt Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Mnt. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Mnt Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Mnt (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Mnt para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Mnt definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.