Mnk2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421658

Descripción general

El gen murino Mknk2 codifica la quinasa de serina/treonina que interactúa con MAP quinasas 2 (Mnk2), un efector aguas abajo de la señalización de ERK y p38 MAPK que modula el inicio de la traducción al fosforilar eIF4E y otros componentes relacionados de la maquinaria de traducción dependiente del cap del ARNm. A través de este nodo, Mnk2 integra señales de estrés y mitogénicas para moldear la traducción selectiva de ARNm, lo que repercute en el crecimiento y la supervivencia celular, así como en las respuestas inflamatorias. La actividad alterada del eje MNK–eIF4E se ha vinculado a programas desregulados de síntesis proteica observados en la biología del cáncer y en patologías mediadas por el sistema inmunitario, lo que convierte a Mknk2 en un punto de entrada útil para explorar el control traduccional impulsado por MAPK en modelos murinos. El análisis funcional de Mnk2 también respalda estudios sobre el “cross-talk” entre vías de señalización, respuestas de genes de respuesta inmediata y traducción específica del contexto bajo estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Mnk2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Mknk2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Mknk2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Mknk2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Mnk2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Mknk2 para la investigación de la señalización de Mnk2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Mknk2 críticos para la función de Mnk2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Mknk2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Mnk2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Mnk2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Mknk2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Mnk2 (m) y el plásmido HDR Mnk2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Mknk2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Mknk2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.