MIP-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422851

概要

Cxcl2は、マクロファージ炎症性タンパク質2（MIP-2）をコードしている。MIP-2はCXCケモカインの一種で、主としてCXCR2を介してシグナルを伝達し、好中球やその他の骨髄系細胞の走化性および活性化を促進する。MIP-2は自然免疫刺激や炎症性サイトカインによって速やかに誘導され、NF-κBおよびMAPKシグナル伝達を、白血球動員を協調的に制御するサイトカイン／ケモカインネットワークへと結び付ける。この軸は、感染、無菌性障害、エンドトキセミアなどの状況における急性炎症反応、血管活性化、組織リモデリングに寄与する。CXCL2/MIP-2シグナルの制御異常は、肺炎症、関節炎、大腸炎、腫瘍関連炎症のモデルにおいて、炎症負荷の指標（リードアウト）としてしばしば用いられる。

MIP-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCxcl2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cxcl2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cxcl2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MIP-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MIP-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cxcl2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MIP-2の機能に不可欠なCxcl2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cxcl2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MIP-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMIP-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cxcl2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MIP-2 HDRプラスミド（m）および MIP-2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCxcl2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCxcl2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。