Plasmide Double Nickase (h) MCPIP: sc-401790-NIC

ZC3H12A code MCPIP (également appelé Regnase‑1), une RNase et une déubiquitinase qui intègre la régulation post‑transcriptionnelle et la signalisation dépendante de l’ubiquitine afin de limiter l’expression des gènes inflammatoires. MCPIP favorise la dégradation de certains ARNm de cytokines et de la réponse immunitaire et module les sorties des voies NF‑κB et MAPK, influençant l’activation des macrophages, les réponses des lymphocytes T et les programmes transcriptionnels induits par le stress. En contrôlant à la fois la stabilité des ARN et l’ubiquitination de protéines de signalisation, MCPIP contribue à l’homéostasie immunitaire et peut influer sur des phénotypes associés à l’inflammation chronique, observés dans des contextes de recherche sur le cancer, l’auto‑immunité et les maladies cardiométaboliques. MCPIP humain est donc fréquemment étudié dans la signalisation de l’immunité innée, le turnover des ARN et le remodelage cellulaire induit par l’inflammation.

MCPIP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZC3H12A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZC3H12A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZC3H12A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZC3H12A.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.