Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
MCM6 Plasmide Double Nickase (h): sc-402146-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MCM6 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MCM6 Double Nickase Plasmid (h) e il MCM6 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MCM6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MCM6 Antibody (H-8): sc-393618
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MCM6 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402146-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MCM6 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402146-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCM6 codifica una subunità centrale del complesso elicasi MCM2–7, che abilita (licensing) le origini di replicazione del DNA e promuove la progressione della forcella replicativa durante la fase S. Attraverso un caricamento regolato sulla cromatina insieme a ORC, CDC6 e CDT1, MCM6 sostiene la duplicazione del genoma, le risposte allo stress replicativo e il coordinamento con vie di checkpoint come ATR/CHK1. Un’espressione o un’attività deregolata di MCM6 è spesso utilizzata come marcatore della capacità proliferativa ed è stata associata a fenotipi di instabilità genomica osservati in diversi tumori e in altri stati iperproliferativi. La perturbazione di MCM6 offre una via diretta per studiare il licensing delle origini, la stabilità della forcella e il controllo del ciclo cellulare nelle cellule umane.
MCM6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MCM6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MCM6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MCM6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MCM6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.